Release Date:2025-07-14

细胞骨架主要由微丝、微管和中间丝所组成,微丝主要是肌动蛋白组成,分为成肌动蛋白和纤维状蛋白单体。鬼笔环肽是一种双环七肽,是从鬼笔鹅膏中分离出来的。可以结合纤维状肌动蛋白,从而可以通过染色显示微丝在细胞中的分布,因此鬼笔环肽荧光染液在生物研究中被广泛使用。

在各种植物细胞或动物细胞中,标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力,平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体,鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显著变化。

✨为什么选择鬼笔环肽?

精准锁定:特异性结合F-肌动蛋白,不与G-肌动蛋白"纠缠" 

信号MAX40倍荧光强度提升,背景噪音一键消除

懒人福音:免去抗体孵育烦恼,30分钟极速染色

全能选手:冰冻/石蜡切片、活细胞、类器官通吃

彩虹战队:488/555/594 三色荧光标记可选

产品信息:

cat.

product name

size

NR21004

Phalloidin-488 dye Reagent

100T

NR21005

Phalloidin-555 dye Reagent

100T

NR21006

Phalloidin-594 dye Reagent

100T

 

实验流程极简版: 固定细胞→透化处理→鬼笔环肽染色→封片观察

实验流程详细步骤

1、培养好的细胞爬片,轻轻吸去培养液,PBS 缓冲液清洗细胞3 次;

24%多聚甲醛固定液室温固定 15-30 min

注意:甲醇能破坏肌动蛋白,因此固定液中不得含有甲醇,避免使用含甲醇的甲醛溶液;

3PBS 清洗细胞 3 次,每次 5 min

4、滴加含 0.1% Triton X-100 PBS 覆盖细胞,室温透化细胞20 min

5PBS 清洗细胞 3 次,每次 5 min

6、用组化笔画在爬片周围画圈。取适量现配的鬼笔环肽染色工作液(1xPBS 150-1200的比例稀释)完全覆盖细胞,室温避光孵育 30-120 min

注意:染色体积可根据样本情况进行调节。孵育过程中为避免染液挥发,可将盖玻片放于密封容器内,此外,鬼笔环肽染色工作液中加入 1% BSA 可有效降低背景;

7PBS 清洗细胞 3 次,每次 5 min

8、向爬片上滴加即用型 DAPI 染色液覆盖细胞,室温染核 5-10 minPBS 清洗细胞3次,每次 1min(选做);

9、滴加抗荧光淬灭封片剂封片;

10、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察结果

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