操作流程示意图：
操作步骤：
1、 爬片准备：多聚甲醛固定15min，PBS洗涤三次，每次5min，Tritonx100破膜15min，PBS洗涤三次，每次5min。
2、 阻断内源性过氧化物酶：细胞孔板内滴加3%过氧化氢溶液，室温避光孵育15 min，PBS（PH7.4）洗涤3次，每次5min。
3、 BSA封闭:细胞孔板内滴加用3% BSA-PBS（或者其他封闭液）均匀覆盖细胞，室温封闭30min（如果爬片盖玻片较大可用组化笔在盖玻片四周画圈）。
4、 加抗体：吸掉封闭液，滴加用抗体稀释液稀释好的一抗，4°C孵育过夜。
5、 加HRP二抗：PBS（PH7.4）洗涤3次，每次5min。滴加与一抗相应种属的HRP二抗覆盖组织，避光室温孵育50min，PBS（PH7.4）洗涤3次，每次5min。
6、 荧光染料反应：浓缩型荧光染料与 TSA buffer 按照 1:50- 1:200 的比例混合均匀，切片滴加配好的TSA荧光染料反应液均匀覆盖组织室温反应1- 15min（最佳时间 5min- 10min），PBS洗三次（预实验可先染 1min洗干净荧光染料后显微镜下观察染色效果，如果阳性弱继续滴加荧光染料加强染色强度直至合适强度后继续进行下一步）反应 2-15min，PBS洗三次。
7、 上一轮抗体洗脱：滴加适量37度预热至完全溶解的抗体洗脱液，37度放置5-20分钟，弃去洗脱液，再次滴加适量抗体洗脱液覆盖样本37度放置5-20分钟，弃洗脱液，PBS洗三次，每次5min。
8、 重复2-7步骤（换用另外一种TYRXXX荧光染料）---第二轮标记
9、 重复2-6步骤（换用另外一种TYRXXX荧光染料）---第三轮标记
…………………………………………………… --- 第N轮标记
10、DAPI染细胞核：PBS（PH7.4）洗涤3次，每次5min。滴加DAPI染液，避光室温孵育10min。
11、封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。
12、镜检拍照：切片于荧光显微镜/共聚焦/多通道荧光扫描仪/多光谱成像系统下观察并采集图像。
参考结果：
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试剂盒产品清单：
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