重组人EGF (Epidermal growth factor) 蛋白

Human EGF Recombinant Protein

Human EGF Recombinant Protein(#JFKR-RP03-100ug/JFKR-RP03-1mg)
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产品信息

货号:JFKR-RP03-100ug/ JFKR-RP03-1mg

规格:        100 ug /1mg

浓度:        冻干粉

种属:        Human

保存条件:    -20°C1年,-80°C2

运输条件:    常温

表达体系:    E. coli

氨基酸序列:  NSDSECPLSHDGYCLHDGVCMYIEALDKYACNCVVGYIGERCQYRDLKWWELR

分子量:      6.3 kDa

内毒素:       < 1.0 EU/μg of the protein as determined by the LAL method

纯度:         还原纯度(SDS-PAGE>95%

活性:         经过胃癌类器官测试,胃癌类器官生长良好

FAQ
1、类器官培养构建常见问题(一)收起

1,什么是类器官

类器官(Organoids)是器官特异性细胞类型的3D细胞集合,这些细胞从干细胞或器官祖细胞发育而来,并能以与体内相似的方式经细胞分序(cell sorting out) 和空间限制性的系别分化而实现自我组建。类器官满足以下特点

  • 必须要有不同的细胞类型
  • 表现出器官特有的一些功能
  • 组成应该和器官相似

2,类器官的优点?

  • 直接来源于患者供体或者实验动物本身,表征与供体更一致
  • 临床一致性高,阴性预测率100%,阳性预测率近90%
  • 周期短,可高通量药物活性筛选
  • 满足从体外到体内科研实验

3,类器官原代遇到的问题?                            

  • 组织初步判断: 样本细胞活性大于等于25。                               
  • 消化时间的控制:对于肿瘤样本来说消化时间在20-120min。
  • 组织样本的保存:样本运输体外离体时间小于72h。

4,在没有新鲜组织的情况下,可以用冻存组织提取的原代细胞进行3D培养吗?

答:文献虽有报道可以冻存组织进行2D或者3D培养,成功率较低,特别是对类器官的培养对细胞活性要求相对较高,不建议组织冻存后进行类器官培养。

5,类器官培养过程中,提取原代细胞后,红细胞需要去除吗?

答:肿瘤组织中本身含有(如:肝,肺等组织)大量红细胞。首先,可以在拿到组织后尽量多清洗几次,能够去除大部分的红细胞;其次,可以使用商品化的红细胞裂解液,也可以不做红细胞处理。

6,类器官冻存的时间和代数选取?

答:类器官冻存建议体积控制在200μm以内,冻存可以选择P2代以后的代数。

7,类器官最快多久可以构建成功?

答:肠道类器官生长速度较快,1-2h可以观察到类器官形态。

8,目前可以通过那些手段辅助鉴别类器官?

答:目前通用的是明场显微镜和病理染色观察形态;结合基因测序可以鉴定所培养的类器官是否有丢失和供体来源的一致性。

9,类器官和肿瘤球有什么区别?

答:类器官包含多种不同类型的细胞,可以在体外自我分化自我组装,具有干性可以进行传代;肿瘤球为单一细胞系通过外=外界物理条件成球,且肿瘤球在后期培养过程中,中间部位会因氧气,营养不足而出现部分死亡。

10,如何避免原代培养中的污染问题?

答:动物源性的样本一般比人源的更容易污染,尤其是一些胃肠、泌尿系统,培养过程可以添加3-5%庆大霉素或者青链霉素,实验室常用抗真菌试剂。

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Datasheet

参考实验步骤