货号: JFKR-Y17632-10/ JFKR-Y17632-100
产品介绍
Y-27632 dihydrochloride是一种高效、选择性、ATP竞争性ROCK抑制剂。Y-27632作用于人胚胎干细胞和类器官能够明显降低细胞分离诱导的细胞凋亡，提高克隆形成效率。
结构式：
分子式：C14H21N3O • 2HCl
分子量：320.26
外观：白色粉末
纯度：≥98%
溶解性：溶于DMSO (30 mg/mL)，溶于水：≥100 mg/mL
使用说明
（一）细胞实验
使用10 μM Y-27632处理转染的Hela细胞30 min，发现Y-27632通过p160ROCK过表达和激活Rho来抑制Rho诱导的黏着斑和应力纤维的形成，但不会抑制细胞中Rac诱导的膜波动。为检测Y-27632对人角膜上皮细胞的作用，用不同浓度Y-27632 (0-20 μM) 孵育人角膜上皮细胞，CCK-8检测结果显示，人角膜上皮细胞数量随Y-27632浓度提高而增加。
（二）动物实验
体内实验中，给不同高血压大鼠分别口服Y-27632 (3, 10, 30 mg/kg)，发现Y-27632显著降低自发性高血压大鼠的血压，作用方式为剂量依赖型，而且Y-27632作用于肾性高血压和脱氧皮质酮-盐型高血压大鼠中也会导致血压显著持续地降低。
1，什么是类器官
类器官（Organoids）是器官特异性细胞类型的3D细胞集合，这些细胞从干细胞或器官祖细胞发育而来，并能以与体内相似的方式经细胞分序(cell sorting out) 和空间限制性的系别分化而实现自我组建。类器官满足以下特点
2，类器官的优点？
3，类器官原代遇到的问题？
4，在没有新鲜组织的情况下，可以用冻存组织提取的原代细胞进行3D培养吗？
答：文献虽有报道可以冻存组织进行2D或者3D培养，成功率较低，特别是对类器官的培养对细胞活性要求相对较高，不建议组织冻存后进行类器官培养。
5，类器官培养过程中，提取原代细胞后，红细胞需要去除吗？
答：肿瘤组织中本身含有（如：肝，肺等组织）大量红细胞。首先，可以在拿到组织后尽量多清洗几次，能够去除大部分的红细胞；其次，可以使用商品化的红细胞裂解液，也可以不做红细胞处理。
6，类器官冻存的时间和代数选取？
答：类器官冻存建议体积控制在200μm以内，冻存可以选择P2代以后的代数。
7，类器官最快多久可以构建成功？
答：肠道类器官生长速度较快，1-2h可以观察到类器官形态。
8，目前可以通过那些手段辅助鉴别类器官？
答：目前通用的是明场显微镜和病理染色观察形态；结合基因测序可以鉴定所培养的类器官是否有丢失和供体来源的一致性。
9，类器官和肿瘤球有什么区别？
答：类器官包含多种不同类型的细胞，可以在体外自我分化自我组装，具有干性可以进行传代；肿瘤球为单一细胞系通过外=外界物理条件成球，且肿瘤球在后期培养过程中，中间部位会因氧气，营养不足而出现部分死亡。
10，如何避免原代培养中的污染问题？
答：动物源性的样本一般比人源的更容易污染，尤其是一些胃肠、泌尿系统，培养过程可以添加3-5%庆大霉素或者青链霉素，实验室常用抗真菌试剂。
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