类器官消化液，品牌：上海解放凯瑞，产品货号：JFKR-XHY-100/JFKR-XHY-500
类器官传代消化液Organoid Digestion Solution可应用于多种哺乳动物（如人、 鼠） 来源类器官的常规传代， 可使类器官从基质胶中分离， 并可使其温和地消化为小细胞簇或单细胞，同时保持其传代后的生长活力。
保存方式：
类器官消化液内含有维持细胞活性营养成分，为了保持试剂营养成分的活性，长期不用建议放于-20 ℃储存，避免反复冻融超过2次。
类器官的消化传代步骤：
注意：
1，在此操作过程中须仔细监测消化过程，避免过度消化。在消化过程中，使用移液器吹打混匀帮助消化。也可实时取少量消化悬液于显微镜下观察消化情况， 当观察到较多的单细胞或直径在 50μm 以下的细胞簇后，即可认为消化完成。
2，在确认消化完成的悬液中， 加入至少5倍体积的类器官传代缓冲液（或PBS）进行稀释， 从而终止消化作用。
3，将上步骤所获类器官沉淀可用于后续类器官培养、 冻存等实验操作。
运用范围:
For Laboratory Research Use Only. Not For Use In Diagnostic Procedures.
1，什么是类器官
类器官（Organoids）是器官特异性细胞类型的3D细胞集合，这些细胞从干细胞或器官祖细胞发育而来，并能以与体内相似的方式经细胞分序(cell sorting out) 和空间限制性的系别分化而实现自我组建。类器官满足以下特点
2，类器官的优点？
3，类器官原代遇到的问题？
4，在没有新鲜组织的情况下，可以用冻存组织提取的原代细胞进行3D培养吗？
答：文献虽有报道可以冻存组织进行2D或者3D培养，成功率较低，特别是对类器官的培养对细胞活性要求相对较高，不建议组织冻存后进行类器官培养。
5，类器官培养过程中，提取原代细胞后，红细胞需要去除吗？
答：肿瘤组织中本身含有（如：肝，肺等组织）大量红细胞。首先，可以在拿到组织后尽量多清洗几次，能够去除大部分的红细胞；其次，可以使用商品化的红细胞裂解液，也可以不做红细胞处理。
6，类器官冻存的时间和代数选取？
答：类器官冻存建议体积控制在200μm以内，冻存可以选择P2代以后的代数。
7，类器官最快多久可以构建成功？
答：肠道类器官生长速度较快，1-2h可以观察到类器官形态。
8，目前可以通过那些手段辅助鉴别类器官？
答：目前通用的是明场显微镜和病理染色观察形态；结合基因测序可以鉴定所培养的类器官是否有丢失和供体来源的一致性。
9，类器官和肿瘤球有什么区别？
答：类器官包含多种不同类型的细胞，可以在体外自我分化自我组装，具有干性可以进行传代；肿瘤球为单一细胞系通过外=外界物理条件成球，且肿瘤球在后期培养过程中，中间部位会因氧气，营养不足而出现部分死亡。
10，如何避免原代培养中的污染问题？
答：动物源性的样本一般比人源的更容易污染，尤其是一些胃肠、泌尿系统，培养过程可以添加3-5%庆大霉素或者青链霉素，实验室常用抗真菌试剂。
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