原理介绍:
EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine),中文名为5-乙炔基-2' -脱氧尿苷,是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够替代胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine) 插入正在复制的DNA分子中, EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如Azide Alexa Fluor 488等)通过一价铜离子催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction),从而可以进行高效快速的检测细胞增殖,特别是可以有效地检测处于S期的细胞百分数。
与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比, EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。
试剂盒组成:
货号 |
品名 |
储存条件 |
RCF043-1 |
PB 10mL |
-20℃ |
RCF043-2 |
AC 1mL*2 |
-20℃ |
RCF043-3 |
CU 400μL |
-20℃ |
RCF043-4 |
488色原50μL |
-20℃ |
RCF043-5 |
100mg/mL EdU母液 100μL |
-20℃ |
备注:AC容易氧化失效,不使用时放入冰箱-20度保存,如发现变色,需更换新鲜试剂。
保存方式:-20℃,12个月
试剂盒组分请参考说明书里面组分保存要求,详细操作步骤请参考说明书。
参考结果图:
以上是50mg/kg标记小鼠6小时的染色图像