原理介绍：
DAB 染色液是特别敏感的二步法免疫组化试剂盒，适合与兔或鼠源一抗配用。其主要过程为，一抗与切片中的靶抗原形成抗原抗体复合物，酶标羊抗鼠/兔 IgG 聚合物二抗（以多聚葡聚糖分子为骨架，辣根过氧化物酶与羊抗鼠/兔 IgG 形成的聚合物）与抗原抗体复合物中的一抗结合，再利用辣根过氧化物酶催化二氨基联苯胺（DAB）在抗原部位形成棕色显色。
试剂盒组成：
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名称 |
货号 |
规格 |
保存条件 |
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DAB原液(100x) |
RCD002-A |
60μl |
4℃ |
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DAB稀释液 |
RCD002-B |
6mL |
4℃ |
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高敏多聚体hrp抗兔鼠二抗 |
RCB054 |
5mL |
4℃ |
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3%过氧化氢 |
RC012 |
10mL |
4℃ |
*DAB显色工作液：DAB 原液(100x)：DAB稀释液=1：100的比例现配现用
其他自备试剂：抗原修复液，PBS，BSA等
石蜡切片免疫组化结果判读：
苏木素复染细胞核为蓝色，DAB显出的阳性表达为棕黄色
保存方式：4℃/RT保存，一年有效期.
试剂盒组分请参考说明书里面组分保存要求，详细操作步骤请参考说明书。
1,如何选择mIHC多重荧光免疫组化的抗体？
石蜡切片免疫组化/免疫荧光：选择包含IHC-P / mIHC；
冰冻切片免疫组化/免疫荧光：选择包含IHC-fr；
细胞爬片免疫组化/免疫荧光：选择包含ICC/IF。
**若抗体说明书上未明确标注IHC是P还是Fr，我们通常默认为两者均适用（具体还需参考说明书内容）。
请注意区分抗体的宿主种属和反应种属的概念。宿主种属指的是抗体从哪种动物中制备，而反应种属则是指该抗体能与哪些样本种属结合。
**抗体的反应种属应涵盖样本种属。**
**原则上，抗体的宿主种属不应与客户样本种属相同。**
**样本为小鼠，应尽量避免使用小鼠来源的一抗，因为若一抗选用小鼠来源，二抗也需使用抗小鼠的二抗，这可能会与小鼠体内的IgG结合，导致产生非特异性反应。若必须使用与样本同种属来源的一抗，建议进行阴性对照实验（在不加一抗的情况下加入二抗，以检测是否存在非特异性反应）。
2, HRP二抗和多聚HRP二抗的区别 ?
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HRP二抗和多聚HRP二抗的区别 |
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特性 |
HRP二抗（浓缩型） |
多聚HRP二抗（即用型） |
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适用实验（优先推荐） |
Western Blot (WB)、ELISA |
IHC、mIHC（多重荧光免疫组化） |
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类型 |
常规单分子HRP标记 |
多聚体HRP标记（信号放大结构） |
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稀释要求 |
需按比例稀释（节省成本） |
即用型，无需稀释（操作便捷） |
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灵敏度 |
常规灵敏度（适合高丰度靶标） |
超高灵敏度（低丰度靶标首选） |
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分子量 |
小分子量（穿透性好，适合WB膜） |
大分子量（穿透性受限，不适用WB） |
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