多聚HRP-山羊抗兔IgG(H+L)二抗

Poly HRP Goat anti rabbit IgG (h+l) secondary antibody(#RCA054)
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产品信息

产品名称

多聚HRP-山羊抗兔IgGH+L

描述

多聚体二抗检测试剂采用了最新的多聚体技术,将酶和二抗聚合成葡萄串式的结构。该技术具有以下优点:1.增加了二抗的酶标密度,提高了检测的灵敏度;2.降低了聚合物的空间位阻,增强了聚合物的组织渗透能力;3.非生物素标记检测系统,避免内源性生物素引起非特异性背景染色。

来源宿主:

山羊

反应种属:

标记

HRP

形式

Liquid

存储方式

4℃,一年

应用

IHC,mIHC,WB

使用方法

即用

实验流程

1.按照常规免疫组化或者TSA免疫荧光步骤,组织切片经脱蜡、抗原修复、双氧水封闭、血清或者BSA封闭、一抗孵育后,PBS洗三次,每次5min

2.二抗孵育:每张切片上滴加50-100 μL 即用型高敏多聚HRP二抗完全覆盖组织,室温孵育30-60minPBS洗三次,每次5min

3.DAB或者TSA荧光染料显色:每张切片上滴加50-100 μL DAB或者TSA工作液,室温孵育数分钟,显色完成后PBS或者纯水冲洗终止显色,PBS洗三次,每次5min

4.细胞核复染:苏木素或者DAPI复染细胞核。

5.封片:组化切片按常规步骤经梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,荧光切片用抗荧光淬灭封片剂封片。

注意事项

1.此高敏多聚HRP二抗为即用型二抗,使用前不用稀释。

2.每张切片抗体使用量根据组织大小均匀覆盖组织为宜。

3.二抗4度保存,避免冷冻结冰。

4.抗体孵育时间及DAB显色时间应根据预实验来摸索合适的实验条件。

FAQ
1、抗体选择FAQ收起

1,如何选择mIHC多重荧光免疫组化的抗体?

 

石蜡切片免疫组化/免疫荧光:选择包含IHC-P / mIHC

冰冻切片免疫组化/免疫荧光选择包含IHC-fr

细胞爬片免疫组化/免疫荧光选择包含ICC/IF

**若抗体说明书上未明确标注IHCP还是Fr,我们通常默认为两者均适用(具体还需参考说明书内容)。

请注意区分抗体的宿主种属和反应种属的概念。宿主种属指的是抗体从哪种动物中制备,而反应种属则是指该抗体能与哪些样本种属结合。

**抗体的反应种属应涵盖样本种属。**

**原则上,抗体的宿主种属不应与客户样本种属相同。**

**样本为小鼠,应尽量避免使用小鼠来源的一抗,因为若一抗选用小鼠来源,二抗也需使用抗小鼠的二抗,这可能会与小鼠体内的IgG结合,导致产生非特异性反应。若必须使用与样本同种属来源的一抗,建议进行阴性对照实验(在不加一抗的情况下加入二抗,以检测是否存在非特异性反应)。

 

2, HRP二抗和多聚HRP二抗的区别 ?

HRP二抗和多聚HRP二抗的区别

特性

HRP二抗(浓缩型)

多聚HRP二抗(即用型)

适用实验(优先推荐)

Western Blot (WB)、ELISA

IHC、mIHC(多重荧光免疫组化)

类型

常规单分子HRP标记

多聚体HRP标记(信号放大结构)

稀释要求

需按比例稀释(节省成本)

即用型,无需稀释(操作便捷)

灵敏度

常规灵敏度(适合高丰度靶标)

超高灵敏度(低丰度靶标首选)

分子量

小分子量(穿透性好,适合WB膜)

大分子量(穿透性受限,不适用WB)

 

支持与下载

Datasheet

参考实验步骤