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产品名称 |
多聚HRP-山羊抗鼠IgG(H+L) |
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描述 |
多聚体二抗检测试剂采用了最新的多聚体技术,将酶和二抗聚合成葡萄串式的结构。该技术具有以下优点:1.增加了二抗的酶标密度,提高了检测的灵敏度;2.降低了聚合物的空间位阻,增强了聚合物的组织渗透能力;3.非生物素标记检测系统,避免内源性生物素引起非特异性背景染色。 |
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来源宿主: |
山羊 |
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反应种属: |
小鼠 |
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标记 |
HRP |
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形式 |
Liquid |
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存储方式 |
4℃,一年 |
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应用 |
IHC,mIHC,WB |
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使用方法 |
即用 |
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实验流程 |
1.按照常规免疫组化或者TSA免疫荧光步骤,组织切片经脱蜡、抗原修复、双氧水封闭、血清或者BSA封闭、一抗孵育后,PBS洗三次,每次5min。 2.二抗孵育:每张切片上滴加50-100 μL 即用型高敏多聚HRP二抗完全覆盖组织,室温孵育30-60min,PBS洗三次,每次5min。 3.DAB或者TSA荧光染料显色:每张切片上滴加50-100 μL DAB或者TSA工作液,室温孵育数分钟,显色完成后PBS或者纯水冲洗终止显色,PBS洗三次,每次5min。 4.细胞核复染:苏木素或者DAPI复染细胞核。 5.封片:组化切片按常规步骤经梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,荧光切片用抗荧光淬灭封片剂封片。 |
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注意事项 |
1.此高敏多聚HRP二抗为即用型二抗,使用前不用稀释。 2.每张切片抗体使用量根据组织大小均匀覆盖组织为宜。 3.二抗4度保存,避免冷冻结冰。 4.抗体孵育时间及DAB显色时间应根据预实验来摸索合适的实验条件。 |
1,如何选择mIHC多重荧光免疫组化的抗体?
石蜡切片免疫组化/免疫荧光:选择包含IHC-P / mIHC;
冰冻切片免疫组化/免疫荧光:选择包含IHC-fr;
细胞爬片免疫组化/免疫荧光:选择包含ICC/IF。
**若抗体说明书上未明确标注IHC是P还是Fr,我们通常默认为两者均适用(具体还需参考说明书内容)。
请注意区分抗体的宿主种属和反应种属的概念。宿主种属指的是抗体从哪种动物中制备,而反应种属则是指该抗体能与哪些样本种属结合。
**抗体的反应种属应涵盖样本种属。**
**原则上,抗体的宿主种属不应与客户样本种属相同。**
**样本为小鼠,应尽量避免使用小鼠来源的一抗,因为若一抗选用小鼠来源,二抗也需使用抗小鼠的二抗,这可能会与小鼠体内的IgG结合,导致产生非特异性反应。若必须使用与样本同种属来源的一抗,建议进行阴性对照实验(在不加一抗的情况下加入二抗,以检测是否存在非特异性反应)。
2, HRP二抗和多聚HRP二抗的区别 ?
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HRP二抗和多聚HRP二抗的区别 |
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特性 |
HRP二抗(浓缩型) |
多聚HRP二抗(即用型) |
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适用实验(优先推荐) |
Western Blot (WB)、ELISA |
IHC、mIHC(多重荧光免疫组化) |
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类型 |
常规单分子HRP标记 |
多聚体HRP标记(信号放大结构) |
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稀释要求 |
需按比例稀释(节省成本) |
即用型,无需稀释(操作便捷) |
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灵敏度 |
常规灵敏度(适合高丰度靶标) |
超高灵敏度(低丰度靶标首选) |
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分子量 |
小分子量(穿透性好,适合WB膜) |
大分子量(穿透性受限,不适用WB) |